La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est une technique de biologie moléculaire utilisée pour amplifier des fragments d'ADN spécifiques. Cela peut être considéré comme une forme particulière de réplication de l’ADN en dehors d’un organisme vivant. La principale caractéristique de la PCR est sa capacité à augmenter considérablement les traces d’ADN.
Présentation d'un cycle de réaction en chaîne par polymérase
Image de Bioninja
Quel est le processus de cycle thermique en PCR ?
La PCR comprend trois étapes de base :
1. Dénaturation de l'ADN matrice : L'ADN matrice est chauffé à environ 93 °C pendant une certaine durée, provoquant la séparation de l'ADN double brin en simples brins, le préparant à la liaison de l'amorce lors du cycle de réaction suivant.
2. Annelage de l'ADN matrice et des amorces : après dénaturation, la température est abaissée à environ 55 °C, permettant aux amorces de se lier aux séquences complémentaires de l'ADN matrice simple brin.
3. Extension des amorces : à 72 °C, le complexe matrice ADN-amorce subit une extension à l'aide de l'ADN polymérase (comme l'ADN polymérase Taq), en utilisant des dNTP comme substrats pour synthétiser un nouveau brin complémentaire basé sur l'ADN matrice.
En répétant les processus de dénaturation, d’hybridation et d’extension, davantage de « brins de réplication semi-conservateurs » sont générés, qui peuvent servir de modèles pour les cycles suivants. Chaque cycle dure environ 2 à 4 minutes, ce qui permet au gène cible d'être amplifié des millions de fois en 2 à 3 heures.
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Heure de publication : 24 septembre 2024