Nous allons décrire ici comment effectuer une électrophorèse sur gel d'agarose par notre chercheur du laboratoire de Liuyi Biotech.
Avant l'expérience, nous devons vérifier l'appareil, les réactifs et autres matériels et outils expérimentaux dont nous avons besoin..
Préparation des appareils et matériels expérimentaux
Les appareils pour l'électrophorèse sur gel d'agarose
Cellule d'électrophorèse horizontale (réservoir/chambre), alimentation d'électrophorèse moyenne et basse tension, système d'image et d'analyse de gel.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) propose différents modèles de cellules d'électrophorèse horizontale (réservoir/chambre) et d'alimentation ainsi que le système de documentation sur gel. Les produits de la série modèle DYCP-31 sont destinés à l'électrophorèse et les produits de la série DYY constituent l'alimentation électrique de l'électrophorèse. Les produits de la série WD-9413 constituent le système de documentation sur les gels. Du petit gel de 60 × 60 mm au gel massif de 250 × 250 mm, nous pouvons répondre à vos différentes exigences en matière de taille de gel. Le modèleDYCP-32Cpeut faire en sorte que le gel atteigne une taille de 250 × 250 mm. LeDYY-6Cest notre alimentation. Il prend en charge une sortie de 400 V, 400 mA, 240 W, qui est notre produit commun utilisé par nos clients. WD-9413BLe système d'image et d'analyse du gel est utilisé pour analyser et rechercher le gel, les films et les transferts après l'expérience d'électrophorèse. Il s'agit d'un appareil de base avec une source de lumière ultraviolette pour visualiser et photographier les gels colorés avec des colorants fluorescents comme le bromure d'éthidium, et avec une source de lumière blanche pour visualiser et photographier les gels colorés avec des colorants comme le bleu brillant de Coomassie.
Les réactifs pour l'électrophorèse sur gel d'agarose
1.Le milieu : gel d’agarose
2.Le tampon : TAE (Tris-acétate, EDTA, acide acétique glacial) et TBE (Tris-borate, EDTA, acide borique).
3. Le tampon de chargement : 6 × tampon de chargement d'ADN (spécial pour les échantillons d'ADN : EDAT, glycérine, cyanol de xylène et bleu de bromophénol)
Le colorant
Le colorant fluorescent comme EB, Gelred, goldview, GenGreen, GenView, SYBRGreen
LeConsommables
Embouts de pipette de stérilisation (10 μL), embouts de pipette (200 μL), embouts de pipette (1 000 μL), tube à centrifuger 200 μL\500μL\1,5 ml.
Marqueur d'ADN
Préparé en fonction du poids moléculaire à tester.
Le Gel coule et observe
Tout d’abord, nous devons préparer le gel d’agarose. La concentration d'agarose dans un gel dépendra de la taille des fragments d'ADN à séparer, la plupart des gels étant compris entre 0,5 % et 2 %. Prenant notreDYCP-31DNpar exemple, vous pouvez lancer un petit gel, un gel large, un gel long et un gel carré selon les exigences de l'expérience. Choisissez le plateau de gel dont vous avez besoin et insérez le peigne, puis versez le gel d'agarose chauffé dans le dispositif de coulée de gel.
Ensuite, une fois que le gel est devenu solide, retirez le peigne avec précaution et doucement, puis placez le plateau de gel dans le réservoir tampon. Versez la solution tampon dans le réservoir tampon et plongez tout le gel dans le tampon. Chargez les échantillons dans les puits avec une pipette standard. Connectez leDYCP-31DNavec l'alimentation électrique de l'électrophorèse correctement et définissez les paramètres pour exécuter le gel.
Visualisez vos fragments d'ADN dans un transilluminateur UV.
AAprès avoir exécuté le gel, vous pouvez utiliser notre modèle de système d'imagerie et d'analyse du gelWD-9413Bpour observer, analyser et prendre des photos du gel. Liuyi Biotech propose également un transilluminateur UV (UV Analyser) pour observer le gel. Nous avons des UV tr de type boîte noireModèle d'ansilluminateur (analyseur UV)WD-9403A, 9403C, WD-9403F, modèle de transilluminateur UV portable (analyseur UV)WD-9403Bet transilluminateur UV portatif (analyseur UV)WD-9403Eà vous de choisir.
Une image d'un gel post-électrophorèse
La marque Liuyi a plus de 50 ans d'histoire en Chine et l'entreprise peut fournir des produits stables et de haute qualité partout dans le monde. Grâce à des années de développement, il mérite votre choix !
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Heure de publication : 29 avril 2022