Membrane d'acétate de cellulose de prétraitement
Membrane coupante :
Coupez la membrane d'acétate de cellulose en tailles spécifiques en fonction de la quantité d'échantillons séparés, généralement 2,5 cm x 11 cm ou 7,8 cm x 15 cm.
Marquage d'une ligne d'application d'échantillon :
- Sur le côté non brillant de la membrane, marquez légèrement la ligne d'application de l'échantillon avec un crayon.
- L'emplacement de la ligne d'application peut être choisi à 2-3 cm d'une extrémité de la membrane ou parfois près de la ligne centrale.
- La position de la ligne d’application est généralement déterminée sur la base d’expériences préliminaires d’électrophorèse.
Immersion dans la solution tampon d'électrode :
- Dans un plat peu profond ou un plat de culture, versez la solution tampon d’électrode.
- Faites flotter soigneusement la membrane sur la surface de la solution tampon d'électrode, en vous assurant que le côté non brillant est tourné vers le bas.
- À mesure que le fond de la membrane absorbe la solution tampon de l’électrode, elle coule progressivement jusqu’à être complètement immergée.
Élimination et absorption de l'excès de liquide :
- Une fois que la membrane a imprégné la solution tampon d’électrode, utilisez une pince émoussée pour la retirer soigneusement.
- Placez la membrane entre deux couches de papier filtre pour absorber l’excès de solution tampon d’électrode, évitant ainsi une sécheresse excessive.
- Si une zone blanche opaque apparaît sur la membrane, indiquant un séchage excessif, replongez la membrane dans une solution tampon d'électrode et absorbez au degré approprié avec du papier filtre.
Exemple de processus de candidature
Choisir et utiliser un exemple de ligne d'application :
Appliquez l’échantillon le long de la ligne d’application de l’échantillon sur le côté non brillant de la membrane, généralement selon un motif linéaire plutôt que par une application ponctuelle.
Exemple d’application d’analyse qualitative :
- Utilisez des tubes capillaires (d’un diamètre de 0,5 à 1,0 mm) ou des moules pour l’application d’échantillons d’analyse qualitative.
- Pendant l’analyse qualitative, plongez l’échantillon et « tamponnez-le » le long de la ligne d’application de l’échantillon.
Exemple d’application d’analyse quantitative :
- Utilisez une seringue microlitre pour l’application d’échantillons d’analyse quantitative.
- Lorsque vous utilisez un tube capillaire ou une seringue microlitre, déplacez-le doucement de haut en bas ou de gauche à droite le long de la ligne d'application de l'échantillon jusqu'à ce que le volume prédéterminé de l'échantillon soit appliqué.
Contrôle des dimensions de la tabulation :
- Après avoir appliqué chaque échantillon sur la membrane, la longueur de la ligne d'échantillon est généralement de 1,5 cm, avec une largeur ne dépassant généralement pas 4 mm.
- La distance entre les lignes d'échantillon et entre la ligne d'échantillon et le bord long de la membrane est généralement de 3 à 5 mm.
Ajustement du volume de l'échantillon :
La quantité ou le volume de l'échantillon appliqué varie considérablement en fonction de facteurs tels que la concentration de l'échantillon, la coloration et les méthodes d'analyse.
Volume de l'échantillon pendant l'analyse quantitative :
Pour l'analyse quantitative, le volume d'échantillon appliqué sur chaque centimètre de la ligne d'application d'échantillon est généralement de 0,1 à 0,5 μl, ce qui équivaut à la quantité d'un échantillon de protéine de 5 à 1 000 μg.
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Heure de publication : 30 janvier 2024